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Revista APF 4(1) 2015
Materiales y métodos
El proceso de estandarización se realizó en las instala-
ciones del Centro Especializado en Biotecnología Re-
productiva (CEBIRE), del Centro de Producción Animal
del IDIAF (CPA), ubicado en el kilómetro 24 de la auto-
pista Duarte, Santo Domingo Oeste (18.547982 latitud
norte y 70.077447 longitud oeste).
Se describen a continuación los pasos de
dicho proceso:
1. Recepción de muestras.
La muestra de semen se conserva en baño maría a
37˚C y se procede a su evaluación Figura 1.
2. Evaluación de muestras de semen.
Para la evaluación de la muestra de semen se toman en
cuenta varios criterios referentes a características ma-
croscópicas (INTA 2004 y Souza 2013) y microscópicas
de la muestra (Figura 2, 3 y 4), estos criterios se presen-
tan en la Tabla 1.
3. Dilución de las muestras.
La determinación de la concentración espermática,
permite determinar la cantidad de espermatozoides
contenidos en la muestra y a partir de esto, calcular la
cantidad de diluyente que se debe agregar al semen y
el número de pajuelas que se pueden procesar de la
muestra colectada Figura 5.
4. Estabilización a 4ºC.
Luego de la dilución, se procede a estabilizar el semen
al menos por 2 horas antes del envasado en pajuelas y
la congelación, para esto se utiliza un refrigerador con
termostato.
5. Llenado de pajuelas.
Las pajuelas se llenan a 4ºC de forma manual o au-
tomática (con máquinas llenadoras) como se muestra
en la figura 6. El llenado se puede realizar también a
temperatura del laboratorio 24ºC antes de enfriar y es-
tabilizar a 4ºC. Una vez llenadas, las pajuelas se sellan
con polivinilo y se congelan.
Figura 1. Entrega de muestras de semen al operador del
laboratorio
Figura 2. Muestra de semen para ser evaluada en
microscopio
Figura 3. Observación de la muestra de semen en microscopio
de contraste de fase
Figura 4.Espermatozoides teñidos con eosina-nigrosina
