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Revista APF 4(2) 2015
Los productos comerciales a base de
Trichoderma
spp.
se cultivaron con diluciones seriadas 102 y 103 en me-
dio de cultivo PDA (papa, dextrosa, agar). Para esto se
diluyó 1 gramo del producto en 9 ml de agua destilada
estéril. Luego de su crecimiento se tomó un disco de 2
mm y se purificó para su posterior enfrentamiento con
el fitopatógeno.
Para el tratamiento con el aceite orgánico se emplearon
dos dosis, 0.2% y 0.4% v/v diluidas en el medio PDA.
El aceite se aplicó al medio de cultivo cuando éste se
encontraba a una temperatura entre 45-50 ºC y luego
se distribuyó en los platos de Petri, procediéndose a la
siembra del hongo fitopatógeno.
El fungicida a base de azoxistrobina se utilizó en la do-
sis recomendadas por el fabricante de 0.15%, el cual se
realizó de dos formas: la primera con el uso de papel
filtro estéril y sumergiéndolo en una dilución del fungi-
cida de 0.15 ml/100 ml de agua destilada estéril, luego
se colocaba un disco del micelio de 2 mm de diámetro
del fitopatógeno en frente del disco de papel filtro con el
fungicida. La segunda realizando la dilución en el medio
de cultivo con 0.15 ml del fungicida en 100 ml de PDA y
se procedió a la colocación de disco de micelio de 2 mm
de diámetro del fitopatógeno.
Se utilizó un diseño experimental completamente al azar.
Los tratamientos estuvieron formados por 18 cepas na-
tivas de
Trichoderma
spp., dos cepas de
Trichoderma
spp. comerciales, dos dosis de los aceites orgánicos y
un fungicida químico-sintético, Tabla 2. La unidad expe-
rimental estuvo formada por un plato Petri.
Se evaluó el crecimiento micelial radial (CMR) de am-
bos microorganismos en milímetros a las 24, 48, 72,
96, 168 y 192 horas. El CMR fue medido sobre la línea
recta que une los centros de los dos discos, donde se
determinó la longitud desde el borde del disco sembra-
do hasta el borde de la colonia en crecimiento, Figura
2. Se determinó el porcentaje del crecimiento micelial
del patógeno inhibido por la presencia de
Trichoderma
spp. Para esto se utilizó una modificación de la fórmu-
la de Abbott (1925) de mortalidad corregida: (Cpt-CpT)
×100/CpT, donde: Cpt = crecimiento del patógeno en el
testigo, CpT= crecimiento del patógeno enfrentado con
Trichoderma
. El antagonismo de los aislados de
Tricho-
derma
sobre el fitopatógeno se clasificó desde nulo a
muy alto, según la escala cualitativa presentada en la
Tabla 3. Esta es una escala arbitraria preparada por la
autora (García
et al.
2013).
Las variables estudiadas se analizaron con el programa
estadístico Infostat
®
, versión 2009 (Universidad Nacio-
nal de Córdoba, Argentina). Se verificaron los supuestos
de normalidad y homogenidad de varianza, y se reali-
zaron análisis de varianza no paramétrico de Kruskal-
Wallis (P≤0.05) seguido de la comparación de rangos
medios para comparar los promedios entre sí y análisis
de contrastes comparando tratamientos agrupados se-
gún las características comunes como género, especies
y tipo de fungicidas.
Tabla 2. Descripción de los 25 tratamientos
n
Tratamientos
Descripción
1 Testigo relativo de
R. solani
El hongo patógeno cultivado frente a un disco de medio de
cultivo (PDA).
20
Trichoderma
spp. vs.
R. solani
Cada una de las cepas de
Trichoderma
spp. (nativas
y comerciales) enfrentadas por separado con cada el
patógeno.
2 Aceites orgánicos vs.
R. solani
El patógeno sembrado en medio de cultivo (PDA) más dos
dosis de una mezcla de aceites orgánicos.
2 Fungicida químico-sintético vs.
R. solani
El patógeno enfrentado por separado con el fungicida
químico sintético en un disco de papel filtro y además
sembrado en medio de cultivo (PDA) más una dosis del
fungicida químico.
